Amniocentese Genética: Coleta de Líquido Amniótico

Classicamente realizada a partir de 15 semanas completas de gravidez, a amniocentese consiste na obtenção do líquido amniótico que banha o feto através da punção da cavidade amniótica.

As células presentes no líquido amniótico podem ser analisadas rapidamente a nível de DNA (citogenética molecular) ou cultivadas por alguns dias para a realização de estudos cromossômicos.

As células presentes no líquido que banha o bebê são originadas por descamação da pele, bexiga, e trato gastrintestinal do feto. Apenas uma minoria destas células está viva e, portanto a cultura é essencial. Geralmente existem células suficientes para iniciar a análise cromossômica em 8-10 dias. Ocasionalmente o crescimento é muito lento, necessitando de mais tempo para o resultado ou mesmo exigindo uma nova punção.

A contaminação do líquido amniótico aspirado com sangue materno ou fetal é uma das causas de falhas na cultura, além de interferir com a citogenética molecular. Estas situações podem ser evitadas com cuidados especiais durante a coleta do material, incluindo a aspiração em uma seringa separada, dos primeiros 1 a 2 ml do líquido amniótico. Porém, todo líquido obtido deve ser encaminhado ao laboratório independente de seu estado, pois muitas vezes podem-se obter resultados válidos mesmo em circunstâncias adversas, evitando-se assim a necessidade de uma nova punção.

A amniocentese é muito segura para o feto e para a mãe e é realizada há quase 40 anos com sucesso. Na nossa experiência, o risco de perda fetal induzida por amniocentese é inferior a 0,1% (1 em 1000). Os riscos e complicações maternas consequentes à realização de uma amniocentese são também pequenos quando a punção é realizada por profissional experiente com a ajuda de equipamentos de ultrassonografia de alta qualidade.

Para realizar exames moleculares para diagnóstico ou para investigação de paternidade pré-natal em amostra obtida por amniocentese realçamos aqui não ser necessária a demorada etapa de “cultura celular”: as células de origem fetal contidas no líquido amniótico – descamadas da pele e do trato gastrointestinal do próprio bebê – são centrifugadas e processadas de forma direta. Inclusive, havendo extrema urgência, um resultado de paternidade pode ser liberado em 24 horas (exame express: consultar disponibilidade e valor).

As coletas em geral não são realizadas antes de 16 semanas de gravidez e, nessa fase, é importante coletar 18 a 20 ml de líquido amniótico.

Se a gravidez estiver mais avançada, o bebê estará maior e haverá mais células dele no líquido amniótico.  Assim, um menor volume de líquido amniótico pode ser suficiente.

Quando motivos técnicos que visam a segurança fetal no delicado procedimento obstétrico invasivo denominado “amniocentese” não permitirem obter os 18 a 20ml de líquido amniótico ideais para coletas com 16 semanas de gravidez, o exame em DNA não fica inviabilizado pois o volume será menor mas nele haverá mais células para extrair o DNA a ser testado. Quando há sangue materno na amostra de líquido amniótico, porém, a situação muda e torna-se essencial uma cultura celular in vitro preliminar. O resultado do exame ficará mais demorado.

DIAGNÓSTICO MOLECULAR DE ALTERAÇÕES CROMOSSÔMICAS EM LÍQUIDO AMNIÓTICO

O Laboratório GENE desenvolveu uma metodologia nova, denominada Citogenética Molecular®, para estudo pré-natal em DNA de líquido amniótico que permite o diagnóstico molecular de alterações de número (monossomias ou trissomias) dos cromossomos 13, 18 e 21,  das  triploidias  (69 XXX, 69 XXY ou 69 XYY), definição do sexo fetal (XX ou XY) e de possíveis aneuploidias sexuais (45X ou síndrome de Turner, 47 XXY ou síndrome de Klinefelter ou 47 XYY Dissomia Y).

A Citogenética Molecular® utiliza a amplificação de microssatélites multialélicos hipervariáveis seguida de resolução eletroforética e densitometria a laser em um Sequenciador Automático Fluorescente de DNA. A Citogenética Molecular® é uma metodologia que pode ser utlizada sozinha.

As vantagens da Citogenética Molecular são:

•  Permitir um resultado rápido.
•  Ser menos dispendiosa do que a citogenética convencional.